Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Produkta apraksts

产品名称

Produkta nosaukums

杂交瘤细胞融合筛选培养基 (HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Cat.Nr

BRS-MED01

规格

Specifikācija

500 ml / μg

500 ml / pudele

产品组分

Sastāvdaļas

DMEM 基础培养基: 80% (体积比)

DMEM bāzes vide: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Importēts liellopu augļa serums (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionēta vide: 10% (v/v)

青霉素: 100 单位/ml

Penicilīns: 100 V/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomicīns: 100 V/ml

次黄嘌呤 (hipoksantīns): 100 uM

Hipoksantīns: 100 µM

胸腺嘧啶核苷 (timidīns): 16 uM

Timidīns: 16 µM

氨基蝶呤 (Aminopterīns): 0,4 uM

Aminopterīns: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Citas piedevas: dažādi citokīni (pietiekamā daudzumā) un uztura bagātinātāji

保存条件

Uzglabāšanas apstākļi

-20 grādi 保存,有效期 18 个月.

Uzglabāt -20 grādu temperatūrā. Derīguma termiņš: 18 mēneši.

使用方法

Lietošanas instrukcijas

培养基融化:

37 grādi 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 静置 3–5 min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Vides atkausēšana:

Atkausējiet barotni 37 grādu ūdens vannā. Noslaukiet ārējo virsmu ar 70% etanolu un novietojiet to izmantošanai bioloģiskās drošības skapī.
Piezīme: Neliela balta flokulējoša materiāla daudzuma parādīšanās pēc atkausēšanas ir normāla parādība. Ļaujiet barotnei nostāvēties 3–5 minūtes, lai floki nosēstos apakšā, pēc tam uzmanīgi savāciet supernatantu lietošanai.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐: 5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:睿, 彭 售, 麓 9 37 grādi 5% CO2 培养箱静置培养.

Šūnu saplūšana un sēšana:

Veiciet šūnu saplūšanu, izmantojot fizikālās (elektrofūzijas) vai ķīmiskās (parastās PEG) metodes. Atkārtoti suspendējiet sapludinātās šūnas tieši šajā barotnē atbilstošā blīvumā un tilpumā:

Elektrofūzija: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ šūnas/iedobē

PEG saplūšana: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ šūnas/iedobē
Ieteicamais tilpums: 200 µL/iedobē 96 iedobju plāksnē.
Kultivēšanai inkubējiet 37 grādu temperatūrā, 5% CO₂.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Vidēja nomaiņa:

4.–8. dienā pēc saplūšanas-veiciet daļēju vai pilnīgu barotnes nomaiņu atbilstoši šūnu augšanas stāvoklim.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Klonu skrīnings:

Kad šūnu kloni iedobēs sasniedz atbilstošu izmēru, veiciet pozitīvu klonu skrīningu.

注意事项

Piesardzības pasākumi

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Šis produkts ir toksisks un paredzēts tikai hibridomas šūnu selekcijai un kultivēšanai. To nedrīkst izmantot dzīvu dzīvnieku audzēšanai, diagnostikai vai terapeitiskiem nolūkiem.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷筆胞 (如 NS1, SP2/0).

Šis produkts ir piemērots hibridomas šūnu selekcijai un kultivēšanai, izmantojot HGPRT selekcijas sistēmu. Tas nav piemērojams TK vai citām atlases sistēmām. Šo barotni nevar izmantot tiešai HGPRT-deficītu šūnu (piemēram, NS1, SP2/0) kultivēšanai.

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Šis produkts ir sterils šķīdums ar pH 7,2–7,4. Visas darbības jāveic aseptiskos apstākļos.