Hibridomas šūnu paplašināšanas un subklonēšanas vide 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Produkta apraksts

产品名称

Produkta nosaukums

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hibridomas šūnu paplašināšanas un subklonēšanas vide

货号 Cat.Nr

BRS-MED02

规格

Specifikācija

500 ml / μg

500 ml / pudele

产品组分

Sastāvdaļas

DMEM基础培养基: 80% (体积比)

DMEM bāzes vide: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Liellopu augļa serums (FBS, importēts): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionēta vide: 10% (v/v)

青霉素: 100 单位/ml

Penicilīns: 100 V/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomicīns: 100 V/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Citas piedevas: atsevišķi{0}}šūnu proliferācijas faktori un mazu molekulu piedevas

保存条件

Uzglabāšanas apstākļi

-20 grādi 保存,有效期 18 个月.

Uzglabāt -20 grādu temperatūrā, derīguma termiņš 18 mēneši

使用方法

Lietošanas instrukcijas

培养基融化:

37 grādi 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Vides atkausēšana:

Atkausējiet barotni 37 grādu ūdens vannā. Noslaukiet ārējo virsmu ar 70% etanolu un ievietojiet bioloģiskās drošības skapī lietošanai.
Piezīme: Neliela balta flokulējoša materiāla daudzuma parādīšanās pēc atkausēšanas ir normāla parādība. Ļaujiet barotnei nostāvēties 3–5 minūtes, lai floki nosēstos, pēc tam savāciet supernatantu lietošanai.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺杍

Fusion Wells — veselīgas šūnas:

Sapludināšanas iedobēm ar šūnām labā stāvoklī (piem., vidēja krāsa normāla vai nedaudz dzeltena, šūnas zem mikroskopa izskatās veselas, spilgtas un normāla izmēra), viegli pipetiet uz augšu un uz leju ar dzeltenu pipetes galu. Saskaitiet šūnas un izklājiet ar 0,8–1,5 šūnas/iedobē 200 µL barotnē.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Apstrāde ar kodolsintēzes urbumiem — suboptimālas šūnas:

Sapludināšanas iedobēm ar šūnām neoptimālā stāvoklī (piemēram, vidēji paskābinātas/dzeltenas vai šūnas izskatās sarucis, tumšas, skatoties mikroskopā), turpmākai subklonēšanai ir pieejamas divas iespējas:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

1. iespēja: pārnesiet šūnas no saplūšanas iedobes uz 24 iedobju plāksni, kurā ir 1 ml šīs barotnes. Pēc 2–3 dienām pēc paplašināšanas saskaitiet šūnas un veiciet subklonēšanu ar 0,8–1,5 šūnas/iedobē 200 µL barotnē. Šajā posmā šūnu dubultošanās ir ierobežota, bet šūnu stāvoklis ir labs, tāpēc tas ir ideāli piemērots subklonēšanai.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培,5%37培CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

Uzmanīgi noņemiet supernatantu no saplūšanas iedobes, izmantojot dzeltenu pipetes galu, un pievienojiet 200 µL svaigas barotnes katrā iedobē. Inkubējiet 37 grādu temperatūrā 5% CO₂ 3–4 stundas. Pēc tam paņemiet šūnu paraugus, saskaitiet un veiciet subklonēšanu ar ātrumu 0,8–1,5 šūnas/iedobē 200 µL barotnē.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Piezīme. Subkloni, kas kultivēti ar hibridomas šūnu paplašināšanas un subklonēšanas barotni, parasti sasniedz stadiju, kas ir piemērota pakārtotajai skrīningam vai analīzei 6.–8. dienā pēc-subklonēšanas.